雷竞技raybet手机网页三萜提取

海洋生物来源药物先导化合物的研究进展【摘要】海洋生物中活性物质丰富，本篇文章对国内外近3年来从海洋生物中分离提取到的萜类化合物以及糖苷类化合物进行了归纳，并对其研究趋势进行了展望。这些新发现的萜类化合物广泛分布于海藻、珊瑚、海绵以及一些海洋真菌等海洋生物中，主要以单萜、倍半萜、二萜、三萜结构型式存在；而糖苷类化合物在海藻、海绵、海参、海星等海洋生物中发现大部分以糖苷脂、甾体糖苷、萜类糖苷型式存在。【关键词】海洋生物萜类化合物糖苷类生物活性【Abstract】.【Keywords】Marineorganism;terpenoid;glycoside;bioactivity海洋是生命之源，由于海洋环境的特殊性，具有高压、低营养、低温（特别是深海）、无光照以及局部高温、高盐等生命极限环境，海洋生物适应了海洋独特的生活环境，必然造就了海洋生物具有独特的代谢途径和遗传背景，必定也会有新的、在许多陆地生物中未曾发现过的新结构类型和特殊生物活性的化合物。萜类物质是一类天然的烃类物质，其分子中具有异戊二烯(C5H8)的基本单位。故凡由异戊二烯衍生的化合物，其分子式符合(C5H8)n通式的均称萜类化合物(terpenoids)或异戊二烯类化合物（isopenoids）。但有些情况下，在分子合成过程中由于正碳离子引起的甲基迁移或碳架重排以及烷基化、降解等原因，分子的某一片断会不完全遵照异戊二烯规律产生出一些变形碳架，它们仍属于萜类化合物。海洋生物中萜类化合物主要以单萜、倍半萜、二萜、二倍半萜为主，三萜和四萜种类和数量都较少，且大部分以糖苷形式存在。萜类化合物是海洋生物活性物质的重要组成部分，广泛分布于海藻、珊瑚、海绵、软体动物等海洋生物中，具有细胞毒性、抗肿瘤活性、杀菌止痛等活性作用。糖苷的分类有多种方法，按照在生物体内是原生的还是次生的可将其分为原生糖苷和次生糖苷（从原生糖苷中脱掉一个以上的苷称为次生苷或次级苷）；按照糖苷中含有的单糖基的个数可将糖苷分为单糖苷、双糖苷、三糖苷等；按照糖苷的某些特殊化学性质或生理活性可将糖苷分为皂苷、强心苷等；按照苷元化学结构类型可分为黄酮糖苷、蒽醌糖苷、生物碱糖苷、三萜糖苷等，海洋类的糖苷大部分是按照此特点分类的，主要包括鞘脂类糖苷、甾体糖苷、萜类糖苷和大环内酯糖苷等，在很多海洋生物如海藻、珊瑚、海参、海绵等中均发现有糖苷类化合物存在。已有的研究表明海洋糖苷类成分大都具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗菌、增强免疫力等生物活性。抗白血病和艾氏癌药物阿糖胞苷Ara-C(D-arabinosylcytosine)1、抗病毒药物的Ara-A2以及Ara-C的N4-C16-19饱和脂肪酰基化衍生物3是海洋糖苷类药物成功开发的典范〔1〕。本篇文章对国内外自2005年来从海洋生物中分离提取到的萜类化合物以及糖苷类化合物进行了总结。1萜类化合物单萜2005年等人〔2〕对从红藻Plo

其原理是，三萜类化合物(triterpeno，ds)是由6个异戊二烯结构单元联结而成的化合物，大部分由30个碳原子组成，少部分含27个碳原子的萜类化合物。它们广泛存在于菌类、蕨类、单子叶、双子叶植物、动物及海洋生物中。多以游离形式或以糖结合成苷或成酯的形式存在。三萜类化合物的结构类型丰富，除个别是无环三萜、二环三萜及三环三萜外，以四环三萜和五环三萜两大类为主。目前大量研究表明，含五环三萜母核的一些三萜化合物具有重要的生物活性，尤其在抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗HIV和护肝等方面显现出令人关注的药理特性，已被大量进行试验和临床预试研究，并且在治疗肿瘤、肝炎和生产化妆品等方面开发了许多药用产品，是一类非常有价值的天然产物。 目前已有多种三萜类化合物的制剂被相继推广上市如齐墩果酸片、复方甘草酸苷注射液以及胶囊等。从白桦树皮中分离出的三萜类化合物具有显著抗癌，抗HIV病毒、保肝护肝活性，这类化合物已引起国内外研究者们的广泛重视，但研究开发甚少。对于这方面研究而言，我国有着显著的自然优势，我国广阔的北方地区分布着大面积白桦资源，这对进一步开发和利用这一丰富的自然资源具有重要意义。本论文主要研究以下内容： 第一部分根据TBP化合物的结构特征采用香草醛-冰醋酸、高氯酸比色法，利用正交试验设计方案选取最佳的比色条件，为下一步测定白桦树皮中总三萜含量提供可靠的依据。结果显示最佳的显色反应条件为：5%香草醛-冰醋酸和高氯酸，反应温度70℃，反应时间15min，体系最佳显色波长为545nm。 第二部分在白桦三萜的提取体系中，采用响应曲面设计(response surface methodology)对在单因素试验基础上选取的料液比、提取温度和提取时间三个主要因素，以白桦三萜提取率为响应值，对其提取工艺参数进行优化，得出TBP的最佳提取工艺条件：提取温度为℃、乙醇浓度为、料液比为1:进行回流提取。其相对应的TBP得率为。表明其在白桦树皮中的含量是比较高的。 第三部分采用高效液相色谱方法，以KromasilC18柱(*250mm5μm)为色谱柱，流动相乙腈-水梯度洗脱；流速为;柱温25℃；检测波长280nm;进样量20μL;检测时间60min。测定10批不同采收期的白桦树皮样品，建立其总三萜类成分的HPLC指纹图谱，并使用相似度分析和主成分分析对指纹图谱进行数据分析。实验标定了9个共有指纹峰，结果表明不同采收期白桦三萜化学成分组成相似，其相对含量变化幅度不明显，方法学考察结果符合指纹图谱技术要求，为中药白桦树皮的质量综合评价提供了可靠的基础信息。 第四部分采用四氯化碳复制小鼠急性肝损伤模型，以各组动物肝脏指数、血清ALT、AST和肝组织中SOD、MDA的含量以及肝脏组织病理学为观测指标，观察不同剂量TBP对CCl4所致小鼠急性肝损伤的防治作用。结果显示，与模型组相比，各TBP给药组肝指数及血清中ALT、AST含量降低，肝匀浆中MDA含量下降，SOD活性增高。病理切片示肝组织变性、坏死有所减轻，提示TBP对此模型小鼠的肝损伤具有一定的防治作用。

北京大学医学部教授、中国食用菌协会副会长、灵芝研究著名专家林志彬教授就曾在《医学学报》（37【7】：574-578）上发表《灵芝三萜类化合物药理作用研究进展》一文中，详细的阐述了灵芝三萜抗肿瘤的机理，并旗帜鲜明地指出，灵芝三萜具有直接抑制肿瘤细胞和良好的阵痛作用。新加坡皇家医药研究中心则证实自然界中除灵芝外其它植物很少含有三萜类，灵芝三萜广泛的生理活性是灵芝（孢子）产品品质控制和功效的重要参数。世界科学及文献也对灵芝三萜进行了深入的研究，共同印证了灵芝三萜（尤其是四环、五环三萜）抑制肿瘤这一真理。“在迄今所发现的103种三萜类化合物中，大部分具有生理活性，可直接毒杀肿瘤细胞和间接抑制肿瘤生长，另外，ganodericacid A、B、C、D抑制组织胺的释放，ganodericacid抑制血管紧张索酶的活性，赤芝孢子酸A降低转氨酶的升高，赤芝孢子内脂A降低胆固醇，等等广泛的生理活性使三萜类逐渐成为灵芝（孢子）品质控制的重要参数。自然界中除灵芝外其它植物很少含有三萜类。三萜类可用甲醇、乙醇、乙醚等作提取原料，然后用乙烷、乙酸乙酯等进行萃取分离出来。”——新加坡皇家医药研究中心“灵芝提取物，在预防癌症发生模式、癌症初期治疗模式、癌症后期治疗模式中，均有抑瘤效果。”——台湾蔡宗统 摘自《灵芝研究专题讨论会论文摘要集》。“目前所知三萜类的种类在灵芝种中，已发现将近二百多种。其他植物中亦有三萜类，但是灵芝含有特殊三萜类（ 特称为“灵芝酸” ） ，为其他植物所没有。灵芝中含有三萜类的主要功能为：抑制癌细胞生长、抑制组织胺释放，防止过敏、促进肝功能、促进血小板凝集、以及降血脂，防中老年人发生心血管发面的疾病。”——《灵芝三萜》韩国植物药研究中心。“三萜类（Trierponoides），以四环三萜化合物为主，具有抗癌、促进肝功能、抗过敏、抗炎止痛之功效。灵芝中三萜含量很高，而其它药用植物含量则很少。”

三萜类提取过程中加酸酸化是为了改变提取物的溶解性，使其能够溶解在酸性溶液中，从而提高提取物的提取率。酸化过程可以使提取物的结构发生变化，从而改变提取物的溶解性，使其能够溶解在酸性溶液中，从而提高提取物的提取率。此外，酸化还可以改变提取物的结构，从而改变提取物的溶解性，使其能够更好地溶解在酸性溶液中，从而提高提取物的提取率。

三萜类提取过程中加酸是为了促进离子交换，以分离活性成分的脱酸作用。此外，也有助于消除有机溶剂和其他无关物质，使得提取出的成分更加纯净。

应该可以 * 。*对照品标准溶液的制备 精密称取齐墩果酸对照品20·0mg,置于100mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,即得齐墩果酸标准溶液,备用。 供试样品的制备 以大豆油为原料,采用氢氧化钾-乙醇回流皂化法提取大豆油不皂化物,经多次结晶后得到大豆植物甾醇。9g氢氧化钾溶于100mL 95%的乙醇中,加入大豆油30g,在氮气保护下加热回流5h后,回收大约一半体积的乙醇,并趁 热将溶液倒入500mL蒸馏水中,溶液为红棕色。冷却至室温后,用乙醚萃取皂化液3~4次,至乙醚层无色为止,合并乙醚提取液,分别用蒸馏水、5%氢氧化钾溶液(10mL/1g油)洗涤一次,再用蒸馏水洗至中性,用无水硫酸钠干燥,除去乙醚得到橙红色蜡状半固体物质,即为大豆油的不皂化物,供进一步分离分析。采取甲醇经多步结晶法,从大豆不皂化物中分离得到植物甾醇,纯度为95%。精确称取植物甾醇20mg,于100mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度线,得到植物甾醇供试样品溶液,备用。 分析方法 精密吸取适量植物甾醇供试样品溶液或齐墩果酸对照品溶液于5mL容量瓶中,加热挥发全部溶剂后,加入一定量新配制的5%香草醛-冰乙酸溶液及一定量的高氯酸溶液,摇匀,在一定温度下,恒温水浴反应一定时间后,于流水冷至室温,加入乙酸乙酯使总量为5mL,摇匀,同时做试剂空白,在最大吸收波长下测定体系的吸光度

酸水解有机溶剂萃取法提取苷元的常用方法，操作：将中药粗粉在酸性溶液中加热水解，滤过，药渣水洗后干燥，然后用有机溶剂提取出皂苷元。也可先用醇类溶剂提取出皂苷，然后加酸水解，滤出水解物，再用有机溶剂提取出皂苷元。